"

金沙9570登录入口

"

珠海维诺种养,每日更新最新水资讯! 收藏本站
您现在的位置:主页 > 泥鳅养殖技 >

大鳞副泥鳅和泥鳅精杂交受精细胞的观察

标签:杂交 受精 形成 分裂 精  日期:2015-05-28 07:55
转基因鱼的研究,一方面了解2种鱼远缘杂交的可能性,选择性发良好的大鳞副泥鳅和泥鳅,受精至受精,受精至受精3min,雌雄原核在胚盘中央融合成一个合核,中粒,讨论,亲缘关系

目前,有关鱼类远缘杂交的受精细胞学研究已见
于金鱼↓鱼、草鱼×三角鲂、青鱼×三角鲂等。大
鳞副泥鳅泥鳅是重要的试验材料鱼,目前已应用于
细胞核移旨膊、转基因鱼的研究、鱼类雄核发的研究
野细胞融合试验等。本研究通过对大鳞副泥鳅和泥
鳅的受精细胞学探讨,一方面了解2种鱼远缘杂交的
可能性,另一方面为其他相关试验提供理论依据。

1、材料与方法

大鳞副泥鳅、和泥鳅、亲本取自武汉市汤逊湖,
根据2种鱼的典型特征区别种类翰∑雄。选择性发
良好的大鳞副泥鳅和泥鳅,用绒毛膜促肖素
(asd1HCG)催,雌鱼剂量为1000IU/尾,雄鱼减半。催
,放入20℃的恒温水中,效应时间为10h。待成
熟,挤出有的,杀雄鱼取得精巢,工授精

得受精。

采用Bouin氏液固定,受精之前对成熟取样
固定,受精至受精,每隔3min取样固定一批,15min
,每隔2min取样固定一批,直至受精37min第1
次裂沟出溪止。每次固定的粒数为50粒左右,
此阶段温度控制在26℃。

受精固定20h脱水,石蜡包埋,连续切片,
切片厚度7~8μm,苏木精伊红染色,并进行显微摄
影。

2、结果

大鳞副泥鳅和泥鳅的受精细胞过程根据受精
发时间和状态,可藩7个阶段。

⑴受精之前
大鳞副泥鳅未受精的成熟直径为0.65~
0.74mm,呈圆球形,透明淡黄色。这时的极性清
晰可见,植物极多为紫红色的黄颗粒填充,动物
极主要集中了染成蓝紫色的细胞质。在胚盘中央可看
到膜上有一明显的凹陷,凹陷中央有一圆孔,这就
是精入的通道~~受精孔,周围没有精细胞存
在。
⑵精入,被激动(asd1受精至受精3min)
精从受精孔进入内;颇ご颖砩鸪

为受精膜,围腔也由此而。在有的组织切片
中,都只看到一个精入,以大鳞副泥鳅和泥鳅
杂交也遵循单精受精的规律。

⑶雄性精核的形成(asd1受精6min和9min)
此时,胚盘较以前更加扩大,精*部核化,精
和星光*离表面,并膨胀核化,形成雄性精核。
在内,雄核正处于解凝过程,并为星光射线
簇拥。雌核始核化并向内部移动,逐渐向雌性
原核发。

由于切片的原因,本试验未观察到第二极*的排
出。

⑷雌雄原核的接触(asd1受精12min)
雌雄原核在星光射线的牵下,相向运动。不
久,雌雄原核非?拷,最它们彼此紧密接触,
仅为一条称为接合线的狭缝相隔,即将形成合核。

⑸雌雄原核的融合(asd1受精17min)
雌雄原核在胚盘中央融合成一个合核。中
粒、星光*已一藩二,呈短棒状位于合核的两侧,
其连线与表面平行,星光*的空间位置决定了第1
次裂只能是纵裂。

⑹第1次裂(asd1受精19~37min)
雌雄原核融合不久,便始进行第1次裂。首

先是核分裂,染色*受纺锤丝的牵而分,使合
核处于第1次有丝分裂的前期。在纺锤*的作用下,
染色*均匀地排列在赤道板中央,此时正处于第1次
有丝分裂中期;紧接着,染色*离赤道板而去,向两
极移动,星光射线更为阔,达有丝分裂期;最,
染色*被拉到两极形成两个核,两核之间的细胞质
似乎也受到纺锤丝的影响而始分离,形成1条白色
的空隙。在表面发细胞质溢缩,形成肉眼可见的
裂沟,完成了第1次有丝分裂。

试验证明,大鳞副泥鳅与泥鳅杂交的受精在恒
温箱中孵化,能够孵化出正常鱼苗(asd1用药)。

3、讨论

异种动物杂交的受精每向前发一步,都是
对精或的一个考验。有时精能够入,但不
能形成星光,因为异种的中粒难以诱发细胞质形成
微丝、微。有的即使了星光,但精*部在异
质的环境盅以实现水合作用,或不能摄入蛋白质而
膨胀核化,这样反由核发而导致单性殖,银鲫
×兴国江鲤的杂交则属于这种类型。在有些动物的杂
交受精中,雌雄原核都能形成并相互融合,但由于两
者细胞分裂周期的差异性,染色*分裂节奏的快慢不
同,造成着丝点?拇杆恐涞呐浜鲜У,最终导?BR>畸形胚胎,杂种鱼正常者仅仅是由于异种精的激
动,由单性殖的结果。因此,这种杂交受精过
程中并无精核的结合,亦即没有真正的受精作用。
但这一理论有一定局限性,许多作者都曾报道了远缘
杂交的鱼类,甚至不同种间杂交存在正常雌雄原核结
合的事实,但有些远缘杂交会出现四倍*代。

本试验中,通过连续石蜡切片,观察到泥鳅精
能够从大鳞副泥鳅的受精孔进入内。精*部
膨胀核化,发出星光,形成星光*。雌雄原核能够融
合成为合;合核能够进行正常的有丝分裂,分裂
中期染色*位于赤道板中央,有丝分裂期,表面
发细胞质溢缩,形成一条白色空隙,而完成正常的
有丝分裂,这一受精过程与刘思阳研究的草鱼×三角
鲂及吴端和刘筠研究的红鲫与湘江野鲤杂交结果
相类似。

泥鳅翰◇鳞副泥鳅为鳅鱼类中两个不同的属,
其粥鳅的染色*有2n=100和2n=50两种,据信泥
鳅的核型曾发过2n=50→2n=100的自然加倍过程,
这两种类型广泛分布于各个地理种群,且不一定有严
格的地理隔离。分布于武汉地区的泥鳅为2n=100类
型,这种天然四倍*泥鳅与2n=48的大鳞副泥鳅杂交
,其杂交代染色*为2n=74,表明其代为杂交

种,并非雌核发或其它发类型。因为这两种鱼属
远缘杂交,其代可能出现性发受阻等现象,有
望通过远缘杂交获得可供养殖的、长速度快的杂交
泥鳅新品种。

从泥鳅翰◇鳞副泥鳅的受精细胞学来看,亲缘关
系较近的鱼类杂交其受精物学过程和裂方式类
似于同种鱼类如花链和鲤鱼的受精过程。表明亲缘关
系较近的鱼类杂交可获得具有正;钅芰Φ拇,
这为鱼类的远缘杂交提供了可能。

1、未受精的成熟在膜凹陷处有一漏斗状的
受精孔(asd1×1000)

2、精从受精孔进入内(asd1×1000)

3、受精6min雄核形成(asd1×1000)

4、雄核形成,为星光射线簇拥(asd1×400)

5、受精9min,雌核核化(asd1×1000)

6、受精12min,雌雄原核彼此接触(asd1×400)

7、受精17min,雌雄原核融合成合核(asd1×400)

8、受精23min,合核第1次有丝分裂的前期
(asd1×400)

9、受精25min,合核进行第1次有丝分裂的
中期。

10、受精29min和31min,合核进入第1次

有丝分裂的期(asd1×200)
11、受精37min,第1次裂完成(asd1×200)


下一篇:没有了